《美娇娘探案社》主要讲述三个性格迥异的女性：事业型女性陈冰冰（朱佳希饰）；学霸型女性林月初（李圣钰饰）；运动活力型女性艾美丽（武金稚饰）。同是同学的三人阴差阳错的在一家中古杂货店得知一个可以穿越过去老式怀表的秘密，于是三人利用这块怀表开了一家“美娇娘探案社”，针对委托人身边发生的一桩桩奇案，通过一次又一次的还原案件原貌，找寻蛛丝马迹、突破重重疑云，使得一场场阴谋渐渐浮出水面.....
故事发生在九十年代北京一座古老的旗人宅院。改革的大潮席卷大都市的同时，也将这座小巷深处的小院中的四户人家卷进了激流之中。小院儿从此少了往日的宁静；小院儿的四户人家也从此少了往日的悠闲，就连院里的老槐树枯死之后，大夏天里街坊四邻乘凉儿的嗜好也没有了...
当年在农村插队的周魏红美丽能干，是闻名的“红姑娘”，她爱上了比她小三岁的陈大志。大志考上大学，魏红也回城当小学教师，大志不惜和母亲决裂与她结婚。靠魏红的工资，丈夫读了大学研究生博士，成为大学副院长，举家到广州定居。夫妻间的共同语言越来越少，可她对丈夫无比信任。魏红的弟弟弟媳下岗，到广州来投奔她，魏红在家里办起了培训班。房间太小，大志要搬到学校住，和她分居。女儿陈悦大学快毕业这一年魏红才知道，大志外面早有了别人。魏红选择离婚，提前内退，回到了重庆开火锅馆。她认识了当年的学长，出租车司机葛大壮。大壮对魏红十分照顾和体贴，让魏红享受到被呵护的幸福。弟弟干涉这段门不当户不对的感情，让魏红为难。大壮帮助女儿陈悦走出了一段不健康的迷恋之后，解除了魏红的心病，也让周魏红看到只有大壮是可以交付终身的人。
高海拉（罗美兰饰）7年前还是在业界叱咤风云的MD(常务理事)，凭借“工作狂”而闻名乘胜前进。但在过去的7年里，她是只埋头专注于育儿和家务事的主妇。在此期间她意识到自己的名字“高海拉”消失了，为了找回原来的角色和位置，她投身到了再就业战线。但在经历中断这一艰难的现实中，没有公司认可她之前的履历，为了重回职场她只好以实习生的身份孤军奋战。
关于四灵仙尊花如月（白鹿 饰）和大成玄尊白九思（曾舜晞 饰）之间的夫妻战争。她究竟是消失的爱人还是另有所图，他究竟是爱她还是要将她绞杀，且看。
飞鸟（Non饰）出生于一位天才棋士之家。飞鸟曾与父母三人共度温馨的童年时光，然而某天，父亲却弃她和母亲而去。此后，飞鸟与母亲相依为命，在困苦中挣扎生活。直到某天，母亲病逝，飞鸟彻底陷入孤独。与此同时，那位抛弃了飞鸟的父亲，却在将棋界功成名就，备受瞩目。望着他的身影，飞鸟心中燃起了杀意。复仇的情绪驱使她，在一次事件的驱动下，毅然踏入将棋世界。她立志成为“史上第一位女性棋手”。这是一个被仇恨束缚的女性，通过将棋一步步找回自我、重拾人生的故事。
